Biosharp、DAPI染色試劑 即用型
產品簡介:
dapi染色液(dapi staining solution)是適用于常見細胞和組織細胞核染色的染色液。dapi即2-(4-amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也稱dapi dihydrochloride,分子式為c16h15n5•2hcl,mw為350.25,cas:28718-90-3。
dapi是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,它可以用于活細胞和固定細胞的染色。和eb(ethidium bromide)相比,對雙鏈dna的染色靈敏度要高很多倍,dapi和雙鏈dna結合后可以產生比dapi自身強20多倍的熒光。dapi染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。dapi也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈dna染色。dapi的*大激發波長為340nm,*大發射波長為488nm;dapi和雙鏈dna結合后,*大激發波長為364nm,*大發射波長為454nm。dapi的發射光為藍色,且dapi和綠色熒光蛋白gfp或texas red染劑(紅色熒光染劑)的發射波長僅有少部分重疊,可以利用這項特性在單一的樣品上進行多重熒光染色。
本dapi染色液為即用型,濃度為10ug/ml,可以直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。
使用方法:
1、對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行dapi染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的dapi染色。
2、對于貼壁細胞或組織切片,加入少量dapi染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。
3、室溫放置3-5分鐘。
4、吸除dapi染色液,用tbst、pbs或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
5、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
注意事項:
1、本dapi染色液的濃度經過優化,確??梢詽M足各種常規染色的需要。
2、熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
3、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4、dapi對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
保存條件:
-20℃避光保存,一年有效。